# 순차적 면역형광염색법 (Sequential Immunofluorescence, seqIF) 순차적 면역형광염색법은 단일 조직 샘플에서 수십 가지 이상의 단백질 표지자를 시각화하기 위한 고도화된 다중(multiplex) 이미징 기술이다. 전통적인 [[면역조직화학 (Immunohistochemistry)|면역형광염색법(IF)]]이 동시에 볼 수 있는 표지자 수가 3-5개로 제한되는 반면, seqIF는 염색-이미징-신호제거 과정을 반복하여 한계를 극복한다. ## 대표적인 seqIF 기술 - **CODEX (CO-Detection by indEXing):** DNA 바코드가 부착된 항체를 이용한다. 모든 항체를 조직에 한 번에 결합시킨 후, 특정 바코드에 상보적인 형광 리포터를 순차적으로 주입하고 이미징하는 과정을 반복한다. - **MxIF (Multiplexed Immunofluorescence):** 형광 신호를 화학적으로 제거(bleaching)하거나 항체를 물리적으로 제거(stripping)하는 방식을 사용한다. 1. 3-4개의 항체로 1차 염색 및 이미징을 수행한다. 2. 형광 신호를 화학적으로 파괴하거나 항체를 떼어낸다. 3. 다음 세트의 항체들로 2차 염색 및 이미징을 수행한다. 4. 이 과정을 여러 번 반복한다. - **t-CyCIF (tissue-based cyclic immunofluorescence):** MxIF와 유사하게 주기적으로 형광 신호를 제거하며 이미징을 반복하는 기술이다. ## 장점 - **고도의 다중성:** 단일 세포 수준에서 수십 개의 단백질 발현 정보를 동시에 얻을 수 있다. - **공간 정보 유지:** [[종양미세환경 (TME)]] 내에서 다양한 세포들의 위치 관계와 상호작용을 그대로 보존한 상태에서 분석할 수 있다. - **세포 아형 식별:** [[유세포 분석 (Flow Cytometry)]]처럼 복잡한 면역 세포 아형을 식별하면서도, 이들의 공간적 분포를 함께 파악할 수 있다. seqIF 기술은 복잡한 [[종양미세환경 (TME)]]의 지도를 그리거나, [[면역항암치료]] 반응 기전을 이해하는 등 최신 면역학 연구에 필수적인 도구로 자리 잡고 있다. --- **관련 문서:** [[면역조직화학 (IHC)]], [[질량 분석 기반 세포 분석법 (Mass Cytometry)]], [[공간 전사체 분석 (Spatial Transcriptomics)]]